顯微鏡資訊:單層細胞自動體視顯微鏡鑒定及培養(yǎng)技術
單層細胞自動體視顯微鏡鑒定及培養(yǎng)技術
培養(yǎng)單層細胞培養(yǎng)是檢測細胞系細胞毒性*常用的方法。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉的,當載物臺上放入單折射的物質時,無論如何旋轉載物臺,由于兩個偏振片是垂直的,顯微鏡里看不到光線,而放入雙折射性物質時,由于光線通過這類物質時發(fā)生偏轉,因此旋轉載物臺便能檢測到這種物體。熒光顯微鏡以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。生物顯微鏡用來觀察生物切片、生物細胞、細菌以及活體組織培養(yǎng)、流質沉淀等的觀察和研究,同時可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細小顆粒等物體。左圖所示為生產的倒置生物顯微鏡型,該生物顯微鏡也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認證的必備檢驗設備。然而,這種方法也被用于研究各種類型的腫瘤活檢材料的化學敏感性,并取得了一些成功。對于人體活檢材料來說,與這種方法相關的*大問題是:首先,成功率低,因為腫瘤細胞并不能一直貼壁和擴張。其次,在腫瘤細胞的培養(yǎng)中,特別容易出現(xiàn)基質細胞(或成纖維細胞或間皮細胞)的污染。某些類型的腫瘤比其他腫瘤更容易出現(xiàn)上述問題。一些細胞鑒定方法是這種檢測的基礎。這些技術已經被毒理學家所接受,因為合適的細胞系可以用來研究特殊器官系統(tǒng)的模型。
從可能的藥物分析處理和回復條件,以及提高藥效的定量研究方法方面來看,本方法我們可能需要提供了*大的靈活性。上述要求所有教學方法中,單層培養(yǎng)學生所需的細胞數(shù)*少,因此,它很適于在較寬的藥物濃度范圍內企業(yè)設計多種技術藥物的篩選,還有一個利于實現(xiàn)自動化生產作業(yè),此領域近年來有較快的發(fā)展。當細胞數(shù)很少時,通常將細胞能夠培養(yǎng)到適于檢測的足夠數(shù)量,盡管沒有經過傳代培養(yǎng)后,細胞的化學敏感性發(fā)生時間變化。2—3次傳代培養(yǎng)是可行的,實際上,常建議公司采用傳代方法,因為它可減少重復樣品之間的差異。當基質細胞環(huán)境污染問題特別嚴重時,傳代提供了通過各種不同酶處理或物理學習方法方式相關細胞分離以便“純化”腫瘤組織細胞培養(yǎng)物的可能性。