普通熒光顯微鏡已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域等生命科學(xué)研究,借助熒光成像系統(tǒng),將普通顯微鏡升級(jí)為數(shù)字化高靈敏度熒光顯微鏡,并增加動(dòng)態(tài)圖像獲取功能,計(jì)算機(jī)代替肉眼或照相機(jī)進(jìn)行觀察或攝像,數(shù)字化的圖像在電腦中進(jìn)一步處理,提高了圖像的清晰度。
熒光成像顯微鏡具有以下優(yōu)點(diǎn):
1)靈敏度很高,可探測(cè)微弱的熒光圖像;
2)對(duì)測(cè)定物質(zhì)的定性或定量分析,實(shí)現(xiàn)熒光準(zhǔn)確定位;
3)通過(guò)切換濾塊,能夠?qū)崿F(xiàn)熒光成像與暗場(chǎng)成像的共定位;
4)對(duì)細(xì)胞的刺激性小,能夠進(jìn)行多重染色檢測(cè)研究分析,適合于觀察切片和活細(xì)胞;
當(dāng)然,熒光成像顯微鏡也會(huì)存在一些不足,主要是細(xì)胞在可見(jiàn)光區(qū)有自發(fā)熒光,掩蓋了標(biāo)記分子信號(hào),難以實(shí)現(xiàn)對(duì)分子的長(zhǎng)期標(biāo)記檢測(cè)。因此對(duì)于生命科學(xué)的研究,熒光成像技術(shù)也是在不斷改進(jìn)中。
熒光成像技術(shù)的應(yīng)用:
蛋白質(zhì)、金屬離子的檢測(cè);
腫瘤疾病的檢測(cè)和診斷;
藥物新劑型研究;
目前熒光成像顯微鏡已成為各個(gè)實(shí)驗(yàn)室及成像平臺(tái)的標(biāo)配成像設(shè)備,是我們?nèi)粘?shí)驗(yàn)研究的好幫手。熒光顯微鏡主要分為三大類:正置熒光顯微鏡(適合切片)、倒置熒光顯微鏡(適合活細(xì)胞,兼顧切片)、體視熒光顯微鏡(適合較大標(biāo)本,如植物、斑馬魚(yú)(成體/胚胎)、青鳉、小鼠/大鼠器官等)。