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可以用熒光顯微鏡同時(shí)記錄兩個(gè)發(fā)射波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度嗎?

作者:admin 瀏覽量:197 來(lái)源:本站 時(shí)間:2022-12-23 11:47:16

信息摘要:

這種操作是可以實(shí)現(xiàn)的,但具體到你的這個(gè)設(shè)計(jì)方案,可能實(shí)現(xiàn)不了。先說(shuō)典型怎么實(shí)現(xiàn):你先至少需要一臺(tái)研究級(jí)熒光顯微鏡,這是因?yàn)檠芯考?jí)熒光顯微鏡可以搭配汞燈或者寬光譜大功率LED光源MG-100、四通道LED光源MG-120等寬光譜燈箱,光源可以同時(shí)發(fā)射出多個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)。

這種操作是可以實(shí)現(xiàn)的,但具體到你的這個(gè)設(shè)計(jì)方案,可能實(shí)現(xiàn)不了。先說(shuō)典型怎么實(shí)現(xiàn):至少需要一臺(tái)研究級(jí)熒光顯微鏡,這是因?yàn)檠芯考?jí)熒光顯微鏡可以搭配汞燈或者寬光譜大功率LED光源MG-100、四通道LED光源MG-120等寬光譜燈箱,光源可以同時(shí)發(fā)射出多個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)。

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然后你需要配一個(gè)雙通熒光激發(fā)塊,比如FISH常用的BG雙通激發(fā)塊,這種激發(fā)塊能同時(shí)通過(guò)B藍(lán)色和G綠色兩種激發(fā)波段,然后實(shí)現(xiàn)兩個(gè)通道熒光同時(shí)發(fā)射,直接形成雙色熒光,就不用切換激發(fā)塊了。

然后來(lái)說(shuō)題主說(shuō)的情況,ZUI大激發(fā)波長(zhǎng)差不多,那么你可能不需要研究級(jí)的熒光顯微鏡,由無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)顯微鏡升級(jí)數(shù)顯熒光模塊的簡(jiǎn)易熒光顯微鏡就夠你激發(fā)了,不能外接燈箱

簡(jiǎn)易熒光顯微鏡,利用整合的數(shù)顯熒光模塊提供激發(fā)光源和配套的激發(fā)塊,不能外接燈箱,因此難以實(shí)現(xiàn)雙通激發(fā),但BGU等單通道激發(fā)都是沒(méi)有任何毛病的,效果一樣很好,很多醫(yī)院和科研機(jī)構(gòu)也在使用。

難點(diǎn)在于發(fā)射波長(zhǎng),發(fā)射波長(zhǎng)通常指染料的發(fā)射峰值,在發(fā)射峰值的前后都會(huì)有一個(gè)光譜范圍屬于發(fā)射波長(zhǎng),如果兩個(gè)染料的發(fā)射峰值并沒(méi)有差太遠(yuǎn),實(shí)際的發(fā)射光就很容易重疊,肉眼或者顯微相機(jī)無(wú)法區(qū)分這種情況,你可能需要有個(gè)積分器或者光譜儀才好辦。

而且回到激發(fā)塊上,如果兩個(gè)發(fā)射光差很多,那么簡(jiǎn)易熒光顯微鏡可能也搞不了,你可能需要定制一個(gè)特殊的熒光模塊來(lái)做簡(jiǎn)易熒光顯微鏡,或者用研究級(jí)寬場(chǎng)熒光,然后定制一個(gè)特殊的激發(fā)塊裝上去,比如,DAPI+Fura2,需要U的激發(fā)濾光片,BG雙通的發(fā)射濾光片。

綜上,我感覺(jué)不樂(lè)觀,因?yàn)榘l(fā)射峰值不是相差很遠(yuǎn)的情況下,發(fā)射光很大概率會(huì)出現(xiàn)重疊,肉眼和相機(jī)都無(wú)法區(qū)分這種光譜相近的光,就好比365nm390nm都是紫外,但你不用積分球、光譜儀是很難區(qū)分兩者的。

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