顯微鏡資訊：在光學(xué)顯微鏡下對(duì)樣品橫截面和縱向切片

在光學(xué)顯微鏡下觀察樣品的橫截面和縱截面

　　標(biāo)本制備

所有組織學(xué)、組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)研究都可以在冷凍標(biāo)本上。體視顯微鏡一臺(tái)儀器。指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺(jué)的雙目顯微鏡。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺(tái)是可以旋轉(zhuǎn)的，當(dāng)載物臺(tái)上放入單折射的物質(zhì)時(shí)，無(wú)論如何旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)，由于兩個(gè)偏振片是垂直的，顯微鏡里看不到光線，而放入雙折射性物質(zhì)時(shí)，由于光線通過(guò)這類(lèi)物質(zhì)時(shí)發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)便能檢測(cè)到這種物體。生物顯微鏡用來(lái)觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究，同時(shí)可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。左圖所示為生產(chǎn)的倒置生物顯微鏡型，該生物顯微鏡也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認(rèn)證的必備檢驗(yàn)設(shè)備。而固定石蠟包埋會(huì)破壞纖維的結(jié)構(gòu)，所以無(wú)法用這些標(biāo)本研究酶和代謝。根據(jù)抗體的性質(zhì)，可以用儲(chǔ)存的石蠟包埋材料一些免疫組織化學(xué)染色，但很難一系列完整的研究。在光學(xué)顯微鏡下，橫切面比縱切面能提供更多的信息。

　　理想的標(biāo)本處理企業(yè)應(yīng)在取材后盡快冷凍，尤其是中國(guó)計(jì)劃我們要做一個(gè)生物學(xué)習(xí)化學(xué)教學(xué)研究時(shí)，但單純形態(tài)學(xué)分析研究問(wèn)題可以用從異地運(yùn)輸來(lái)的標(biāo)本，必要時(shí)用輕輕沾濕的紗布包起來(lái)，防止干燥，但延誤不要超過(guò)幾個(gè)小時(shí)。外地運(yùn)輸來(lái)的標(biāo)本因?yàn)樽冃缘拇嬖诙绊憣W(xué)生生物化學(xué)技術(shù)檢查，任何一種形式的商業(yè)化運(yùn)輸方式方法都一樣。從尸體解剖結(jié)構(gòu)材料管理可以自己獲得更多一些社會(huì)有意義的信息，但酶組織環(huán)境化學(xué)染　　色幾乎不能做。一些相關(guān)蛋白的免疫細(xì)胞組織發(fā)生化學(xué)染色如肌球蛋白和層粘連蛋白水平可以在死后的解剖標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)，但是肌營(yíng)養(yǎng)不良素和胞漿膜蛋白在尸體解剖材料已經(jīng)不能被檢出，主要內(nèi)容取決于標(biāo)本從患者對(duì)于死亡到冷凍的時(shí)問(wèn)長(zhǎng)短。

將試樣直接浸入液氮中會(huì)在試樣周?chē)a(chǎn)生氣態(tài)氮，從而延遲試樣的凍結(jié)過(guò)程。 更快的冷凍過(guò)程和保存組織結(jié)構(gòu)的更好方法是將異戊烷在液氮中預(yù)冷至1609c。 異戊烷首先包含在容器中，然后浸入液氮中直到完全固體，然后再加熱到固體和液體共存的點(diǎn)。

我們通常將試樣固定在標(biāo)有試樣名稱(chēng)的軟塞上，這樣試樣就可以很容易地從恒冷切片機(jī)的卡盤(pán)上取出并且容易保存。標(biāo)本放置在一個(gè)軟插頭和 Oct 固定劑是放在周?chē)幕A(chǔ)標(biāo)本。然后將帶有試樣的軟塞置于液體異戊烷中。冷卻時(shí)間必須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，部分取決于樣品的大小，通常10-20秒就足夠了。如果時(shí)間太短，會(huì)造成肌纖維中冰晶的假象，如果時(shí)間太長(zhǎng)，標(biāo)本就會(huì)斷裂。在準(zhǔn)備切片之前，冷凍組織塊在攝氏40度或更低的溫度下儲(chǔ)存。長(zhǎng)期儲(chǔ)存的樣品*好放在液氮中，以免因停電造成損失。在切片之前，軟塞被凍結(jié)在切片機(jī)的標(biāo)本架上。切片后,