顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)衍生實(shí)驗(yàn)中非常重要的儀器。目前，市場上有各種類型的顯微鏡。對于剛剛?cè)胄械男“讈碚f，選擇一個(gè)符合需求、適用的是一個(gè)挑戰(zhàn)。這里我們將介紹倒置顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡的原理供您選擇?！　?/span>

1.倒置顯微鏡

與普通顯微鏡相比，倒置顯微鏡的物鏡和照明聚光系統(tǒng)以載物臺(tái)為軸顛倒，物鏡在載物臺(tái)下方，照明系統(tǒng)在載物臺(tái)上方。采用這種結(jié)構(gòu)，可以顯著擴(kuò)大照明聚光系統(tǒng)與載物臺(tái)之間的有效距離，便于放置較厚的待觀察器具，如培養(yǎng)皿、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等。

由于倒置顯微鏡觀察的材料一般是培養(yǎng)的細(xì)胞，透明度高，結(jié)構(gòu)反差不明顯，倒置顯微鏡往往配有相差物鏡，實(shí)際上構(gòu)成了倒置相差顯微鏡。

2.相差顯微鏡

在相差顯微鏡檢查時(shí)，只有當(dāng)透射光的波長(顏色)和振幅(亮度)隨周圍介質(zhì)發(fā)生明顯變化時(shí)，才能用肉眼分辨出視場中的樣品。當(dāng)照明光通過無色透明的物體時(shí)，透射光的波長和振幅沒有明顯變化，尤其是振幅幾乎不變。因此，當(dāng)用普通的光學(xué)顯微鏡觀察時(shí)，很難分辨這種物體的結(jié)構(gòu)。需要通過固色、染色等物理化學(xué)方法，使樣品的透射光與背景在波長或振幅上發(fā)生變化，即在顏色和亮度上存在差異，從而進(jìn)行鑒別。

相差顯微鏡不同于普通的光學(xué)顯微鏡，裝置中有四個(gè)必不可少的部件：相差顯微鏡(內(nèi)部有相位板)、帶環(huán)形光闌的轉(zhuǎn)盤聚光鏡、軸對準(zhǔn)望遠(yuǎn)鏡和綠色濾光片。關(guān)鍵是相位差物鏡和環(huán)形光闌，更具體地說是相位板和環(huán)形光闌。光源產(chǎn)生的光通過環(huán)形光闌和聚光器形成環(huán)形光錐，照射待檢物體，產(chǎn)生直射光和衍射光。兩者分別經(jīng)過相位板上的共軛面和補(bǔ)償面，產(chǎn)生干涉。共軛面和補(bǔ)償面上的鍍膜可以使直射光和衍射光的相位分別滯后1/4.導(dǎo)致干涉光的振幅加強(qiáng)和減弱，從而產(chǎn)生亮反差和暗反差。從而即使被檢測的物體沒有被染色也可以被清楚地區(qū)分。

3.熒光顯微鏡

熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收和運(yùn)輸，化學(xué)物質(zhì)的分布和定位等。熒光顯微鏡采用發(fā)光效率高的點(diǎn)光源，通過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(紫外光365nm或紫外藍(lán)光420nm)作為激發(fā)光，激發(fā)標(biāo)本中的熒光物質(zhì)發(fā)出各種顏色的熒光，再通過物鏡和目鏡的放大觀察。在這樣強(qiáng)烈對比的背景下，即使熒光微弱，也容易識(shí)別，靈敏度高。主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能和化學(xué)成分的研究。